DR. Ramón Tormo Carnicé - Análisis de heces en la pediatría.

INTRODUCCIÓN
La cuantificación de la eliminación de principios inmediatos en heces es de capital importancia en pediatría tanto en condiciones normales, para evaluar la digestibilidad de una dieta determinada, como en circunstancias patológicas, tales como las afecciones pancreáticas, enfermedades hepatobiliares e intestinales. La forma adecuada de hacerlo, es la de determinar la grasa, nitrógeno, agua, almidón y azúcares en heces recogidas, lo que dará una preciosa información sobre la función digestiva del individuo estudiado, o bien la digestibilidad de una dieta determinada, a la que se podrá modificar la composición en grasas, proteínas, agua o hidratos de carbono, para poder comprobar la eliminación cuantitativa de los principios inmediatos añadidos.

El nitrógeno fecal es de particular interés en sujetos con maldigestión de proteínas que conduce a una creatorrea (por encima de 2,5 gr. en heces de 24 h, o el 2%), directamente relacionada con la pobre secreción a la luz duodenal de enzimas proteolíticos y bicarbonato en enfermos afectos de insuficiencia pancreática exocrina (1).

El estudio de la grasa en heces es de utilidad en el diagnóstico y evaluación de la evolución de la enfermedad y respuesta a la terapéutica con enzimas pancreáticos, en la insuficiencia pancreática exocrina ya sea por fibrosis quística de páncreas o bien por pancreatitis a repetición (2,3). También en el diagnóstico de otros síndromes malabsortivos.

El estudio del agua en heces es de utilidad para la evaluación de la respuesta a diferentes regímenes o fármacos en la diarrea crónica de cualquier etiología; si se trata de una malabsorción con pérdida de grasa en heces, generalmente el contenido en agua es elevado (por encima del 85%), aunque en ocasiones, la grasa no absorbida reacciona con el calcio de la dieta tampoco absorbido y origina jabones calcáreos, que conceden a las heces una dureza especial y un contenido en agua inferior a veces al 80% a pesar de un contenido elevado en grasas. En la pérdida aumentada de proteínas también se puede hallar un contenido en agua elevado pero esto se dará sobre todo en la malabsorción de azúcares, por la presión osmótica en el colon elevada que inducen los azúcares no absorbidos y fermentados por la abundante flora bacteriana del intestino grueso; así en la malabsorción de lactosa, es frecuente hallar un perfil fecal de excreción de grasas normal (por debajo del 5%), de nitrógeno fecal normal (por debajo del 2%), de almidón generalmente normal (por debajo del 1%) pero elevado en azúcares, bien por encima del 4% (normal del 2,5 a 3,5 %); un perfil similar lo podemos hallar en la diarrea crónica por hiperperistaltismo de causa hormonal o nerviosa, con aumento de la excreción de azúcares y agua, pero normal excreción de proteínas y grasas. También podría ser el patrón de heces típico de las dietas excesivamente ricas en hidratos de carbono y normales en proteínas y por ello, proporcionalmente bajas en grasas.

Hasta hace poco la esteatorrea se determinaba por el método de VAN DE KAMER (4, 5, 6, 7) que requería la colección durante 3 días de las heces eliminadas, tras ser marcada la dieta de ese lapso de tiempo con carmín; posteriormente había que batirlas, homogeneizarlas y triturarlas, para posteriormente pasar a la hidrólisis de los triglicéridos, y titulación de los ácidos grasos libres con sosa.

El nitrógeno fecal, se determinaba con el método de Kjeldahl y el agua fecal por el peso de las heces antes y después de la liofilización (método de Karl Fisher).

METODO DE INFRA-ROJOS.
Los métodos tradicionales para la cuantificación de la grasa en heces (4-7) del nitrógeno (8,9 y el agua (10) reúnen muchos inconvenientes como son los de homogeneización, extracción, destilación y tiempo consumido en exceso. Por ello hemos utilizado un método para la determinación de la grasa, nitrógeno, agua, almidón y azúcar basado en el análisis de la reflexión de infrarojos (11,12). Esta técnica se basa en la medición de las radiaciones en el espectro cercano de infrarrojos ( Fecal Near Infra-Red= FENIR) difundido por la superficie de la muestra, es decir en la relación entre matriz y substrato y la reflexión de infra- rojos difundida por la superficie fecal a una determinada longitud de onda. Los componentes medidos poseen unos determinados grupos funcionales (CH, NH, OH...etc.) poseyendo bandas específicas de absorción en el infra- rojo cercano (700 - 2500nm). Por ello la respuesta espectroscópica (reflexión) a partir de una muestra fecal está relacionada con la concentración de los componentes (grupos funcionales). La correlación de la reflexión tomada a 12 longitudes de onda está determinada por un algoritmo computarizado.

La puesta en práctica de este procedimiento requiere una calibración, que se ha realizado en 80 muestras de heces para los parámetros mencionados (grasa, nitrógeno, agua y azúcares (13), que previamente se analizaron por los procedimientos clásicos mencionados:

Para las grasas por el método de Van de Kamer (4)
Para el nitrógeno fecal por el método de Kjeldahl (8,9)
Para el agua fecal por el método de Karl Fisher (10) por liofilización y congelación.
Para los azúcares, por el método de recuperación.

Las heces fueron recogidas en contenedores de plástico y fueron analizadas el mismo día o bien guardadas en congelación a menos 20º hasta el momento del análisis (11, 12, 13). Parte de ellas fue destinada a la determinación de principios inmediatos por los procedimientos clásicos citados; otra parte de ellas fue destinada al análisis por el método FENIR.